Трансплантация эмбрионов-2021: что новенького? Аналитический обзор. Часть I

ТЭ: импортозамещение в действии

«Война — это все приходящее,
а музыка вечна».

К/ф «В бой идут одни старики», 1973

В аналитическом обзоре приведена статистика наших и зарубежных стран в 2021 г., который памятен еще тем, что исполнилось 70 лет появлению на свет первого в мире теленка после хирургической ТЭ корове (США, Willet et al., 1951).

Важно сравнить и понять уровень использования современных репродуктивных технологий в племенном животноводстве нашей страны и за рубежом. Куда и правильно ли движется РФ в современной эмбриологии с.-х. животных и какое место по значимости в Европе занимают наши эмбриологи-практики. Эту тенденцию еще важно уяснить в связи со сложностями в международной торговле племенными ресурсами, когда ускоренное размножение приобретенных ранее животных, может стать безальтернативным. Перефразируя Мичурина, можно констатировать, что мы не можем больше ждать милостей от лидеров племенного скотоводства, взять их у имеющегося поголовья – наша задача.

Благодаря информации, предоставленной эмбриологами из 10 предприятий РФ и 3-х лабораторий ТЭ РБ, мы подвели итоги 2021 года и отправили статистику эмбриотрансфера наших стран в отраслевые сборники европейской (АЕТЕ) и мировой ассоциаций специалистов ТЭ (IETS). Всем участникам опроса, большое спасибо! Список подразделений ТЭ и ответственных эмбриологов отечественной ТЭ приведены в табл. 4.

У автора были опасения, что наши страны не попадут в статистику стран Европы-2021, владеющих приемами ТЭ, в связи с событиями на Украине, но этого не случилось. Россия и Беларусь по-прежнему в обойме статистики европейского эмбриотрансфера АЕТЕ. Как сказал бы известный актер с Украины: спецоперация – это все приходящее, эмбриология – вечна.

РФ и РБ в числе 49 стран-членов АЕТЕ

Не участвовали в сборе статистики по ТЭ или не проявляли ТЭ-активности в 2021 г. 9 стран:

Возвращение блудной Британии. После организации британской ассоциации эмбриологов и ТЭ (BETA) в статистику АЕТЕ наконец вернулась Великобритания и сразу заняла передовые позиции в европейском эмбриосборе In vivo (табл.1).

Возглавил ВЕТА эмбриолог Питер Мэй, тот самый Мэй, знакомый российским эмбриологам по семинару-ТЭ в г. Казани 28 – 29 ноября 2013 г. Как тесен мир ТЭ даже спустя 10 лет! Вспомним старенькое? [1]

В окружении благодарных слушательниц

 Статистика АЕТЕ – 2021 Invivo

«Я любовью ломала стены
Я считала, что ты мой избранный,
А ты обыкновенный»

Алена Петровская, «Обыкновенный», 2019

Сбор эмбрионов в ЕС за прошедшие 20 лет вернулся на уровень 2000 г. (можно сказать «упетрился») и составил 22.3 тыс. вымываний/год. 

Сбор эмбрионов в ЕС за период 2000-2021 гг.

Аналитики из АЕТЕ [2] сделали топ-10 стран с наивысшим сбором эмбрионов от коров-доноров в прошлом году, в который РФ вошла со своим 5-м местом в этом списке, и в этой связи мы можем говорить о некотором лидерстве в ЕС. Российские эмбриологи в 2021 г выдали свои 4% европейского эмбриосбора In vivo (вместе с Республикой Беларусь – 5.3%).

Мы расширили этот список до 13 (чертовой дюжины) ведущих стран в производстве эмбрионов, чтобы он вместил статистику наших коллег из РБ.

Вместе с коллегами из Республики Беларусь – мы сила, 5.3% вымываний эмбрионов Европы, 1183 эмбриосборов, 6959 зародышей, пригодных для ТЭ. А если считать в сравнении с прибалтийскими «моськами» из Латвия + Эстония + Литва с их 8-ю вымываниями за прошлый год, показатели РБ по сборам эмбрионов (295) выглядят размером со слона.

Так что нашим коллегам из РБ можно приглашать к себе соседей на повышение квалификации и не только по технике In vivo. В прошедшем году группа эмбриологов из Университета в г. Гродно украсила свою статистику 481 зародышем, выращенными «в пробирке» (In vitro), которые были пересажены свежими и после разморозки 211 и 43 телкам-реципиентам соответственно.

Казалось, мы в Европе с использованием ТЭ «ломаем стены» (см. эпиграф), и наше 5-е место – для избранных. Оказалось – результат обыкновенный, если не сказать, что – провальный.

Пятикопеечное «лидерство»

«А толку? Маловато будет!..
Маловато, понимаешь…
Маловато будет!»

М/ф «Падал прошлогодний снег», 1983

Почему слово лидерство автор взял в кавычки? РФ на протяжении нескольких лет находиться в пятерке ведущих стран Европы по производственной ТЭ In vivo (табл. 3). А ведь до 2015 года место российской ТЭ было в середине-конце списка стран участниц ТЭ (например: сбор эмбрионов 2012 г. составил всего 95 вымываний). Этот успех ТЭ на российских фермах – дань мудрости директоров племхозов и способностям отечественных эмбриологов-практиков. Вместе с импортным скотом на российские фермы зашли современные технологии его размножения. Ведется работа по импортозамещению завоза племенного скота с использованием ТЭ - но в каких объемах? 

Вернемся к цифрам статистики. Кажется, что пятое место в рейтинге из 23 стран ЕС для российских эмбриологов - не так уж плохо. Успех! Ура! А вот и нет, вовсе не ура.

Если считать не по номиналу проведенных вымываний доноров, а по охвату поголовья ТЭ, разделив число вымываний коров на их числен­ность, то наше место в охвате поголовья ТЭ будет в конце рейтинга охвата европейской ТЭ. Маловато будет! 

В отношении нашего лидерства в европейской ТЭ, есть предположение, что руководство российской биотехнологической отраслью в науке и на производстве (РАСХН, ВИЖ, МСХ) быстрее расправятся с отечественной ТЭ в племенном животноводстве, чем это могли бы сделать недоброжелатели России извне. Так «пробирочная» техника ТЭ-2020/2021 в РФ уже схлопнулась, [3] кто следующий?

Вернемся к «охвату». К лицу ли россий­ским скотоводам быть в окружении европей­ских парнокопытных карликов? О чем это автор? Российское стадо, по численности коров невысокой продуктивности на порядок (!) опе­режает Данию, в пять раз превышает поголо­вье коров в Нидерландах и в 2 раза обгоняет поголовье Германии - ежегодного лидера ЕС по извлече­нию эмбрионов (табл. 1). То есть имея сходное с Данией число извлечений эмбрионов у доноров, шанс наших рекордисток дождаться эмбриолога в 13 раз ниже, чем у полумиллионного стада Дании.

Для 8 млн коров Франции, 5 млн коров Германии и 1,6 млн коров Нидерландов уровень охвата суперовуляцией доноров составляет соот­ветственно 0.8, 0.9 и 1.6 гол на 1000 поголо­вья. В Беларуси для суперовуляции привлекли каждую 0,2 корову-донора из каждой тысячи голов. Для 8 млн стада коров РФ надежда получить ТЭ-обслуживание составляет всего 0,1 коровы из каждой тысячи имеющихся, или один донор на каждые 10 тыс. поголовья (!). Так что наши с РБ пять процентов (пять копеек) в эмбриосборе ЕС – всего лишь очень небольшой вклад, а нашим ориентиром на долгие годы может стать Франция со своим 7.7-млн. стадом коров и третью европейского эмбориосбора. Вот за кем надо тянуться: вымывать не 900 доноров ежегодно, а по 6-7 тысяч доноров ежегодно. Производить не 6 тыс. эмбрионов (табл. 3) и 2.5 тыс. телят-ТЭ, а в 5 раз больше, как Франция (37 тыс. эмбрионов, 15 тыс. телят-ТЭ).

Еще хуже дела в российской «пробирочной» ТЭ (табл. 3, внизу). Если в Европе уровень производства эмбрионов In vitro держится на уровне 20-25 тыс. эмбрионов, в мире выращивает 1 млн. зародышей в год, то в РФ с 2020 г. в «пробирочной» ТЭ наступил полный штиль – околонулевой показатель. 2017-2018 гг. мы не берем в учет российской ТЭ In vitro, поскольку она проведена на российских фермах бразильскими специалистами из фирмы «In vitro Brasil, IVB». Спасибо «Мираторгу!».

И это несмотря на очередное недавнее заверение Владимира Путина о приоритетном развитии внутри страны ключевых направлений биотехнологических исследований. После того как отечественная «пробирочная» ТЭ-2020 испустила дух, и мы об этом с сожалением писали год назад [3] и даже устроили торжественные «похороны» с участием 9.3 тыс. приглашенных читателей, президент вновь заверил, что: «Россия должна стать лидером по всем основным направлениям науки и технологий. Среди важнейших направлений развития страны он назвал генетику, цифровые технологии, биоинженерию» (i-gazeta.com, 08.09.22). Где же наши биотехнологические прорывы ВИЖа имени академика Эрнста, когда во всех околовижевских НИИ были закрыты структуры, разрабатывающие российские приемы практической ЭКО-ТЭ племенного скота.

Пока по «основным направлениям», среди которых ускоренное воспроизводство племенного скота и его импортозамещение внутри страны, развиваются совсем плохо. О «лидерстве» наоборот (спасибо ВИЖу) порассуждаем позднее, сначала подведем итоги 2021 года в традиционной ТЭ In vivo.

Российско-белорусский эмбриосбор 2021 г. в подробностях

«Тщательнѐй надо, ребята.
Общим видом овладели,
 теперь подробности не надо пропускать».

Михаил Жванецкий, 1987

География (табл. 4, 5) российской ТЭ не очень обширна и представлена 10 хозяйствами и предприятиями, которые давно и с удовольствием используют биотехнику размножения в производственных целях: Поволжье, Подмосковье, Кубань (в т.ч. овцы), Рязань (лошадь) и Западная Сибирь. В Республике Беларусь 3 предприятия научно-племенного типа: Брест, Минск и Гродно.

Сбор на донора. Средний сбор эмбрионов на суперовуляцию по нашим данным составил 5.8 эмбрионов и колебался с начала века от 5.3 до 6.6. Снижение выхода качественных эмбрионов может наблюдаться при использовании в схемах суперовуляции плацентарных гонадотропинов (ГСЖК) и препаратов ФСГ низкого качества, применении sex-ИО, использовании в качестве доноров эмбрионов телок половозрелого возраста.

Sex-ориентация. В 63% суперовуляций российские специалисты применили искусственное осеменение (ИО) доноров sex- спермой. В «Чебомилке» 41.3% суперовуляций сопровождались «женской» спермопродукцией. В нетрадиционном ИО мы «умыли» ЕС, и это тот редкий случай, когда эта ориентация идет на пользу российскому производителю молока. О причинах «девичника» в российской эмбриологии, который в 3 раза превышает европейские sex-предпочтения, мы писали в предыдущем материале [4]:

«Эмбриологам в нынешней ситуации племенного рабства, следует и дальше наращивать использование сексированной спермопродукции. В противном случае половина с таким трудом полученных телят-ТЭ уйдет на откорм». Пока не созданы ассоциации породного скота – нет и системы оценки быков-производителей, ждем изменений в Законе о племенном деле.

В Европе sex-предпочтения не так выражены. Лишь 12 % сборов происходит с семенем выбранного пола. Эмбриологи из 11 стран предпочитают «нетрадиционное» ИО доноров. Более всего в молочных стадах Греции (100%), Португалии (97%), Швейцарии (70%), России и Испании (по 63%).

Обзор «мяса». В АЕТЕ - 2021 г. показатели ТЭ у молочных пород доноров составили 81% и мясных - 19%. Лидеры «мясной» индустрии в Европе: Франция Бельгия, Россия и Германия.

В РФ 63% эмбриосбора осуществлено в мясном скотоводстве и это несомненная заслуга АПХ «Мираторг» и компании ООО «Биоинновации», обслуживающей это предприятие по ТЭ. Дело в том, что: «В настоящее время общее поголовье … специализированной мясной породы абердин-ангус "Мираторга" превышает 700 тыс. голов. В ближайшие несколько лет его планируется увеличить до 1 млн голов за счет собственных ресурсов» (milknews.ru, 30.04.20). И 1.5 тыс. телят-ТЭ, рожденных из почти 4-х тысяч эмбрионов прошлого года (табл. 4) способствуют решению этой задаче импортозамещения. Им бы только помочь с «пробирочными» технологиями на примере сотрудничества с «IVB» 5 лет назад. Одним словом – так держать!

«Молоко». У эмбриологов РБ сильные (100%) предпочтения донорам молочных пород. В РФ 35.6% сборов (чуть больше трети) эмбрионов получено от доноров молочных пород, По сбору качественных и на 100% сексированных эмбрионов по-прежнему лидирует лаборатория ТЭ КМТК (Кубань) – почти 1000 качественных зародышей в 2021 г. или примерно 400 дополнительных телочек-ТЭ от высокопродуктивных голштинов американской селекции. Зав. лабораторией КМТК Александр Дуванов – самый успешный эмбриолог российской ТЭ 2020-2021 гг. (его даже может наградят…). В уходящем 2022 году в лаборатории ТЭ КМТК прошли кадровые перестановки – будем надеяться, что они не скажутся на лидерстве предприятия в эмбриологии молочных пород.

Вклад российских предприятий в итоговый эмбриотрансфер-2021 г. показан в таблице 4. 

  ** Только крупный рогатый скот

1. ООО «Биоинновации» Краснодарский край, г. Гулькевичи, Меньшенин В. В.

2. ООО «Кубанский молочно-товарный комплекс», лаборатория ТЭ, Кубань, Дуванов А.В.

3. ООО «Чебомилк» лаборатория репродуктивных технологий, г. Новочебоксарск, Мадисон В.В.

4. ООО «ЦРТ», центр репродуктивных технологий, Самарская обл., Кнуров Д.А.

5. АО «Рассвет», Краснодарский край, лаборатория ТЭ, Мехоношин М.В.

6. ООО «Можгаплем» Республика Удмуртия, лаборатория ТЭ, Осипова Л.П.

7. ТО АПК Томск АИР (ассоциация инновационного развития), лаборатория репродуктивных технологий, Хоменко В.А.

8. ООО «Элита», Республика Татарстан, г. Сабы, начальник селекционно-племенной станции Гитиятов Р.Р.

9. ВНИИ коневодства, Рязанская обл., Лебедева Л.Ф., Солодова Е.В. Другие исполнители: Курганинский агротехнологический техникум, Нижебовская А.В, Анастасьев Е.С.; конный Клуб Neverland, Шмелева И.В.

10. ООО НПО ЦБиТЭ «Центр биотехнологий и ТЭ», Московская обл., Рузский район, д. Сытьково, Столповский Ю.А.

11. РБ. Республика Беларусь: Гродненский аграрный университет, Дешко А. Другие исполнители: РСУП «Брестплемпредприятие» Жук Н.; г. Жодино, НПЦ «Национальной академии наук Беларуси по животноводству», зав. лабораторией - Богданович Д.

Недобор производства качественных эмбрионов молочных пород (-1.5 тыс.) в 2021 г. был компенсирован прибавкой примерно того же числа зародышей мясных пород. Тем не менее, потеря нескольких предприятий ТЭ в прошлом году грозит сползанием РФ в середину европейского списка, тем более что в производстве эмбрионов нас поджимают Великобритания, Австрия и Швейцария (4602, 3753 и 3321 зародышей соотв.).

Общий выход качественных эмбрионов в АЕТЕ, РБ и РФ составили соответственно 62.2%, 65.3% и 74.5% всех зародышей и ооцитов соотв. Средний выход качественных эмбрионов в эмбриосборе составил 5.8, 3.7 и 6.6 соотв. Последние цифры говорят о несколько завышенной статистики качества эмбрионов у некоторых российских специалистов. Не может в РФ выход качественных зародышей превышать общеевропейский по причине дефицита проверенного ФСГ в стране и увеличенном проценте sex-сборов. Тщательнѐе надо считать, как предлагал Михаил Жванецкий…

Потрогать технику ТЭ In vitro за вымя

«Сегодня вечером мы с божьей помощью
впервые потрогаем господина Корейко за вымя.
Трогать будете вы, Шура».

И. Ильф, Е. Петров «12 стульев», 1927

На фоне российского «пробирочного» провала в России, о котором мы уже упоминали [3], в наступающем 2023 году может состояться экспорт эмбрионов, технологии In vitro и учителей из РБ на российские фермы. Будем (и уже начали) учиться «пробирочным» технологиям у наших соседей (фото).

ТЭ In vitro в исполнении бригады белорусских специалистов из ГГАУ
(руководитель А. Дешко, справа), совместно с сотрудниками
лаборатории ТЭ «Чебомилк», август 2022 г.

Летом уходящего года состоялся визит бригады эмбриологов из Гродненского государственного аграрного университета (ГГАУ), который позволил за 10 рабочих дней в ООО «Чебомилк» провести аспирацию фолликулов (и ооцитов из них) у 98 коров и телок доноров, вырастить в инкубаторе до стадии бластоцисты 147 зародышей, провести ТЭ первые два десятка из них.

Чтобы выполнить подобный эмбриосбор в условиях традиционной ТЭ, понадобилось бы провести через суперовуляцию около 40 доноров и два месяца непрерывной работы по извлечению эмбрионов.

Говоря словами сатириков, вынесенных в эпиграф, эмбриологи из Гродно под руководством Шуры Дешко впервые потрогали за вымя технику производства эмбрионов in vitro в ООО «Чебомилк» и в целом в Республике Чувашия. Какие впечатления (фото)?

• Манеж для доноров должен быть удобен, с хорошей фиксацией. Аспирация яйцеклеток у коров-доноров (Ovum Pick-Up, OPU) не вызывает трудностей у специалистов, владеющих УЗИ сканером. Требует четкости в отборе доноров (не все из них подошли для аспирации ооцитов, OPU).

• Техника In vitro требует особой собранности и дисциплины к специалистам-эмбриологам. Лабораторная эмбриология ЭКО занимает до 80 % рабочего времени, тогда как в In vivo подходы к донорам и лабораторная часть распределяются примерно поровну. 

• Особо повышенные требования (в отличие от техники In vivo) по условиям чистоты и стерильности к помещению ЭКО лаборатории.

• Настоящая морока с зародышами начинается в лаборатории эмбриологии, для работы в которой нужны специалисты очень высокой квалификации. Тут мало научить технике переноса зародыша в несколько сред и капацитации спермы – нужно из специалиста сделать настоящую «няньку» для недельных зародышей.
  

Аспирация (отсасывание) фолликулов из яичника под УЗИ-контролем, OPU. Метод проникновения иглы к яичнику (на фото) – трансвагинальный, через свод влагалища. Применяется принудительный (вакуумный) метод аспирации.  Вместе с фолликулом в сосуд сбора попадает яйцеклетка.

Оплодотворить ооцит сексированной спермой быка (можно одним сперматозоидом, техника ICSI) и «вынянчить» неделю в условиях инкубатора – высший пилотаж ТЭ

Продолжение следует

Ссылки:

1. https://dairynews.today/news/etapy-proydennogo-puti.html

2. https://www.aete.eu/publications/statistics/

3. https://dairynews.today/news/transplantatsiya-embrionov-2020-in-vitro-rynok-emb.html

4. Трансплантация эмбрионов-2020. 1. In vivo: итоги года (dairynews.today)
   

1. ООО «Биоинновации» Краснодарский край, Гулькевичский район, г. Гулькевичи, Меньшенин Владимир Викторович

2. ООО НПО «Центр биотехнологий и ТЭ», Москва Рузский район, д. Сытьково, д. 27 Столповский Юрий Анатольевич

3. ООО «Кубанский молочно-товарный комплекс» Краснодарский край, Дуванов А.В.

4. ООО «Чебомилк» лаборатория репродуктивных технологий, г. Новочебоксарск, Мадисон Виктор Владимирович

5. ООО «ЦРТ», Самарская обл., Кнуров Денис Анатольевич

6. АО «Рассвет», Краснодарский край, Мехоношин М.В.

7. ООО «Можгаплем» Республика Удмуртия, Осипова Лариса Павловна

8. АИР (ассоциация инновационного развития) АПК ТО, Томск, Лаборатория репродуктивных технологий, Хоменко Василий Александрович

9. ООО «Элита, Республика Татарстан, г. Сабы, начальник СПС (сел. племенной станции) Гитиятов Раушан Рашитович

10. ФГБНУ «ВНИИ коневодства», Рязанская обл., г. Рыбное, Лебедева Людмила Федоровна, Солодова Е.В. Другие исполнители: Курганинский агротехнологический техникум, Нижебовская А.В, Анастасьев Е.С.; конный Клуб Neverland, Шмелева И.В.

11. РБ. Республика Беларусь: УО «Гродненский государственный аграрный университет», Александр Дешко. Другие исполнители: Центр ТЭ ПХ «Литвиново» РСУП «Брестплемпредприятие» Николай Жук; г. Жодино, НПЦ Национальной академии наук Беларуси по животноводству», зав. лабораторией - Дмитрий Богданович; РУП «Научно-практический центр Национальной академии наук Беларуси по животноводству» - заведующий Сергей Сапсалев.

Мадисон Виктор – канд. биол. наук, лаборатория репродуктивных технологий

ООО «Чебомилк», Чувашия